24小时服务热线:13671843966
  • 1
  • 2
  • 3
你当前的位置: 网站首页 > 技术文章

标准集团分享避免这些就能大大提高高效液相色谱柱使用寿命

上海千实精密机电科技有限公司成立于2012年,是由一群经验丰富的工程师以及逐渐崭露头角的设计专家组合而成的团队,千实机电专注于研发、设计及生产纺织类等物理性能测试仪器。公司总部位于上海,为各国公司、学术研究单位及检测机构提供纺织测试仪器和服务,上海千实是目前国内较有竞争力和研发实力的纺织测试仪器厂家之一,本着全心全意为客户服务,努力推动我国纺织检测仪器技术革新而努力。

上海千实精密机电科技有限公司品牌是Qinsun,主要开发和生产许多基础型纺织测试仪器,包括水洗色牢度测试仪、织物耐磨仪、起毛起球性测试仪、摩擦色牢度测试仪、耐熨烫牢度测试仪和汗渍色牢度测试仪等,这些产品在纺织测试领域中被广泛使用。为了满足使用者的实验需要,我们也推陈出新,提供您创新实用的测试仪器。Qinsun产品包含了汽车饰件测试仪、环境气候老化测试仪、纤维测试仪、纱线测试仪、织物面料测试仪、地毯测试仪、土工布测试仪及其它行业相关的测试设备。

避免这个问题就能提高高效液相色谱柱其使用寿命


色谱柱用久后常出现柱压升高,柱效降低,峰形畸变, 保留时间改变等变化,如不采取适当措施,色谱柱将无法再使用,缩短色谱柱的使用寿命。在高效液相色谱仪的使用中,保持高效液相色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。


1.流动相对色谱柱的损害因素


颗粒杂质:目前广泛使用的柱填料直径多在10um以下,微小的颗粒杂质很容易使柱子发生堵塞,因此使用的溶剂应当过滤,柱子上端接头应当装微孔过滤片以阻挡颗粒物进入柱中。


水溶液中的微生物:以水溶液为流动相时,应防止细菌的生长,五氯酚、叠氮化钠、辛酸等能防止细菌生长。当用水溶液或有机酸缓冲液保护柱子时,一些厌氧霉菌可能在色谱柱中滋生,堵塞固定相颗粒间的空隙。


pH值:对硅胶基键合相填料,水溶液pH值不可超过2-7.5这一范围,当pH>8时,硅胶会释出


生成絮状物堵塞柱子,且难以复原,柱效很快降低,甚至完全失效。


盐类析出:当在流动相缓冲液中加入和水混溶的有机溶剂时,其中的盐类溶解度下降,可析出盐类沉淀,堵塞柱子;加入粘度不同的样品溶液也可能发生类似现象。所以缓冲液中盐的浓度宜低,样品提取液的组成应和流动相匹配。


2.样品对色谱柱的损害因素


杂质堵塞:样品中的微粒同样会使柱子堵塞,样品也应进行过滤处理。


样品组分的不可逆吸附:通常被吸附的组分有蛋白质、醣等,可以采取加装保护柱,或使用适应的溶剂反冲来处理。常用溶剂有四氢呋喃(适用于溶解有机高聚物和工业样品中的焦油)、高浓度的脲或盐酸胍溶液(使蛋白质改性而洗脱)、高离子强度的磷酸盐缓冲液(pH=7,适合反相柱和离子交换柱,可除去蛋白质和醣等)。


样品组分与固定相反应:这种反应对NH2柱的影响较严重,NH2易和酐、酮形成希夫(Schiff)缩合而减少活性点,使保留时间缩短,因此羰基化合物样品和流动相(如丙酮、乙酸乙酯等)不宜使用NH2柱。


活性点被覆盖:由于固定相吸附样品中的组成或杂质而使活性点被覆盖,在柱压升高的同时保留时间减少,将样品过滤或使用萃取分离柱(对大分子有机物如蛋白质、白细胞等)效果较好。


3.色谱柱固定相的化学变化


色谱柱固定相分解、活性基团变性以及键合相基团脱落会使保留时间显著变化。


1)键合相基团脱落


绝大多数键合相都是通过硅氧硅键(Si-O-Si)连接在硅基质上,形成带有机基团的固定相Si-O-Si-R(R为 G18H37、C8H17、CnH2n+1)。硅氧硅键可在水溶液中水解而断裂,使键合相基团脱落,对C2和NH2柱键合相基团脱落不可忽视。为减少或防止基团脱落,可增加流动相的有机溶剂量,降低离子强度和pH值,对基团已脱落的固定相,可用合适的硅烷试剂再生。


2)固定相分解或活性基团变性


例如氰基柱的保留时间显著缩短,但键合相中C、H、N的百分含量并无大变化,证明未发生—CN水解成-COOH反应,而是形成了衍生物。在硅上增加烷基可减少水解。


4.高效液相色谱柱的保养


色谱柱在使用一段时间后,常遇到柱子受污染,柱效下降的问题,采用适当的方法对色谱加以保护和再生,能够延长色谱柱的使用寿命。